2021-67
一、實材料及試劑培養板、酒精燈、移液槍、CO2培養箱、顯微鏡等MC3T3-E1(前成骨細二、實驗內容試驗方法:將MC3T3-E1(前成骨細胞)細胞接種于含MEM-α培養基(10%胎牛血清,1%青鏈霉素)的培養瓶內,放置于二氧化碳培養箱(37℃,5%CO2,潮濕)培養,每三天更換一次培養液,待細胞鋪滿瓶底的80%以上時,用胰蛋白酶消化,加入MEM-α培養基(10%胎牛血清,1%青鏈霉素),將細胞吹打下來并吸取到10mL離心管中,離心,棄上清,注意不要碰到管口,加入MEM-α培養...
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2021-67
【步驟】(以間接免疫熒光法為例)1細胞準備與固定(1)單層生長細胞:取對數生長細胞,用0.25%胰蛋白酶消化,制成單細胞懸液。將細胞接種到預先放置幾張6×22mm蓋玻片的培養瓶或培養皿中,置二氧化碳培養箱培養1-3天,待細胞接近長成單層,取出蓋玻片,進入PBS(0.01mol/L,pH7.4)洗2次,然后根據實驗目的,選擇適當固定劑固定細胞。常用固定劑有:95%乙醇(固定時間10-30min),丙酮(5-10min)等。(2)懸浮生長細胞:取對數生長細胞,用PBS離心洗滌(1...
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2021-67
二氧化碳培養箱是通過在培養箱箱體內模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內的生長環境,培養箱要求穩定的溫度(37°C)、穩定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對飽和濕度(95%),來對細胞/組織進行體外培養的一種裝置,是細胞、組織、細菌培養的一種先進儀器,是開展免疫學、腫瘤學、遺傳學及生物工程所必須的關鍵設備。今天喆圖小編就來給大家解答一下二氧化碳培養箱的幾個常見問題。1、二氧化碳培養箱的濾器能用多長時間?半年到幾年的都有,建議用戶1年更換一次...
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2021-64
二氧化碳培養箱濃度可以通過紅外傳感器(IR)或熱導傳感器(TC)進行測量。兩種傳感器各有優缺點。熱導傳感器:熱導傳感器監控CO2濃度的工作原理是基于對內腔空氣熱導率的連續測量,輸入CO2氣體的低熱導率會使腔內空氣的熱導率發生變化,這樣就會產生一個與CO2濃度直接成正比的電信號。TC控制系統的一個缺點就是箱內溫度和相對濕度的改變會影響傳感器的精確度。當箱門被頻繁打開時,不僅CO2濃度,溫度和相對濕度也會發生很大的波動,因而影響了TC傳感器的精度。當需要精確的培養條件和頻繁開啟二...
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2021-64
無菌操作是決定細胞培養成敗的關鍵因素,即便使用設備完善的實驗室,若實驗者粗心大意,操作不規范,也會導致污染。因此,所有操作都要最大可能的保證無菌,每一項工作都必須做到有條不紊和*可靠。1、實驗進行前:在開始實驗前要制定好實驗計劃和操作程序。有關數據的計算要事先做好。根據實驗要求,準備各種所需器材和物品,如二氧化碳培養箱、凈化工作臺、離心機等,清點無誤后將其放置操作場所(培養室、超凈臺)內,然后開始消毒。這可以避免開始實驗后,因物品不全往返拿取而增加污染機會。2、無菌操作工作區...
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2021-64
細胞復蘇細胞復蘇是將保存在液氮或-80℃冰箱中的細胞株解凍并重新培養的過程。細胞復蘇的關鍵是快速。防止在解凍過程中,產生的水珠形成冰晶損傷細胞。細胞復蘇一般步驟如下:1.預先加熱水浴鍋,溫度至37-40℃,并在離心管中準備好10mL培養基2.從液氮罐或冰箱中取出細胞,迅速放進預熱的水浴鍋中,鑷子夾住凍存管晃動,使其受熱均勻3.當凍存管內*融化時,注意用酒精擦拭凍存管消毒,將液體倒入含有10mL培養基的離心管中4.離心5min,去除上清,得到沉淀5.用培養基懸浮沉淀,并接種到培...
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2021-63
1)對于哺乳動物細胞在自然的溫度生長最好,CO2氣體維持在體內pH值,類似于在血液中二氧化碳CO2濃度;高濕度能防止培養基的蒸發;所有這些環境參數確保細胞正常表達蛋白質。適當的培養環境對于敏感的原代細胞和干細胞尤其重要。但是每次打開二氧化碳培養箱的門時,培養箱內的條件受到實驗室環境影響急劇變化。一旦關上門,培養箱重新快速恢復設置參數。細胞是否能長時間在設定條件下生長,取決打開培養箱門的時間和頻次,培養箱結構和反饋調節系統。2)不同的結構和反饋調節系統會導致*不同的恢復時間。結...
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2021-63
高溫馬弗爐烘爐原因和作用:高溫馬弗爐什么時候要烘爐?下面喆圖小編依靠專業知識匯總了高溫馬弗爐進行烘爐的原因和作用。對高溫馬弗爐進行烘爐的原因和作用:高溫馬弗爐,智能馬弗爐等高溫電爐在長期放置后,高溫馬弗爐內部的氧化鋁陶瓷纖維、加熱元件碳化硅、耐火磚等保溫材料吸收空氣中的水分,長期放置后再次使用我們需要將保溫材料烘干,達到良好的實驗環境,提高高溫馬弗爐的使用壽命和精度。如何判斷高溫馬弗爐需要烘爐:高溫馬弗爐何時需要烘爐?很簡單,如果廠家沒有進行烘爐,需進行烘爐處理。長期擱置后再...
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